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5XOne-Step RNA TaqMan qPCR Mix

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A2302A 5XOne-Step RNA TaqMan qPCR Mix 250T 1000
A2302B 1000T 3200
5XOne-Step TaqMan qPCR Mix是采用TaqMan探针法进行Real-Time PCR的专用试剂,适用于FAM/HEX/TET/JOE等标记探针(本品也适用于Molecular Beacon探针)。其中5XOne-Step TaqMan qPCR Mix将抗体封闭的热启动Taq DNA聚合酶、MLV反转录酶、Rnase Inhibitor、反应Buffer、dNTP等试剂预混在一起,是一种5×浓度的单组分预混试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单,只需加入引物、探针、模板、水即可。
该预混物中的DNA聚合酶为抗体封闭的热启动 Taq DNA 聚合酶,该酶在50℃以下无活性,只有95℃加热后才能完全恢复酶的活力。以RNA为模板时,在50℃条件进行反转录反应,再进行95℃加热并启动PCR反应,为一步法qPCR(One Step qPCR)。

组份

名称 250T×20 μl 1000T×20 μl
5×One-Step RNA TaqMan qPCR Mix 1 ml 1 ml×4
50×ROX Reference Dye 200 μl 200 μl×2

主要特征

  • 热启动酶采用抗体封闭,100%热启动
  • 单组份预混液,使用方便快捷
  • 高特异性,有效抑制非特异性扩增
  • 高灵敏度,可检测低丰度基因
  • 适用于所有实时定量PCR仪器
  • 应用

    基因检测和基因诊断试剂开发。

    注意事项

    1. 5×One-Step RNA TaqMan qPCR Mix于-20℃保存时容易形成沉淀,可用手轻握或室温放置一段时间后,颠倒混匀待其完全融解后使用。
    2. 本制品请避光保存(短期6个月内使用可置于4℃),使用频率低时置于-20℃,反复冻融会使制品性能下降。
    3.配制反应液时,注意避免强光照射,并于冰上操作。

    储存

    1、长期保存,请避光置于-20℃或-70℃可保存3年。
    2、经常使用,融化后可置于4℃,可保存1年。 注:长期-20℃保存可能会出现沉淀,室温融化后混合均匀,不影响试剂性能。

    实例

    一步法TaqMan qPCR试剂
    Fig. 以A549细胞RNA为模板,将该模板100 ng/μl进行8个2倍稀释,即模板分别为:50 ng/μl、25 ng/μl、12.5 ng/μl、6.25 ng/μl、3.12 ng/μl、1.5 ng/μl、 0.75 ng/μl、0.38 ng/ul、0.19 ng/μl,每个反应体系加模板2 μl,用5XOne-Step RNA TaqMan qPCR Mix进行扩增检测,如图所示,A:本制品在宽广的模板量区间内具有卓越的线性关系:扩增效率 99.2%,R2 =0.9934。 B:以6.25 ng RNA为模板进行qPCR检测,共24个重复,由图可看出重复性良好。C:图A扩增所得标准曲线。