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Bst DNA聚合酶是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分,具有很强的链置换活性,以及5’→3’的DNA聚合酶活性,因此可以应用于LAMP (Loop-mediated isothermal amplification)检测实验。 LAMP是一种新型核酸扩增技术,采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物,依赖与Bst DNA聚合酶的强链置换活性,在30~60分钟内DNA扩增可达109~1010倍。 在LAMP的高效反应过程中会产生大量的焦磷酸根离子,其与镁离子结合形成焦磷酸镁白色沉淀,因此在实验过程中可通过浊度仪检测反应液的浊度变化进行实时定量检测。也可在反应结束后肉眼直接观察焦磷酸镁沉淀,根据是否形成白色沉淀来判断反应是否发生。 |
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主要特征 |
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组分 |
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储存 |
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-20℃可保存3年,避免反复冻融。 | |||||||||||||||
实例 |
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应用LAMP浊度扩增试剂盒对不同模板量样本进行浊度扩增,65℃45min,结果如下图。泳道1-6模板量分别为0.01ng、0.05ng、0.2ng、1ng、5ng、20ng, C为对照(不加模板)。 | |||||||||||||||
LAMP引物设计与实验指南 **本公司免费为客户设计LAMP引物,需要设计引物者请来信咨询,Email:info@haigene.cn. |
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注意事项 |
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(1). 为了减少交叉污染,请分区操作(试剂和模板DNA的配置操作最好在不同区域中进行)。 (2). 实验时,所需模板量取决与样品类型(0.1 ng~100 ng),可先进行预实验确定模板量。 (3). 各区物品均为专用,不可交叉使用,防止污染。 (4). 实验过程中应穿工作服,带手套,建议使用带滤芯的一次性吸嘴。 |
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