| 产品编号 |
产品名称 |
规格 |
价格(元) |
说明书 |
| C2001 |
Benzonase核酸酶
(科研级) |
25KU |
400 |
 |
| 100KU |
850 |
| 10000KU(工业级） |
50,000 |
| C2002 |
无内毒素Benzonase核酸酶 |
25KU |
500 |
|
| 100KU |
1,500 |
| 5000KU(工业级） |
45,000 |
| C2003 |
Strep tagII Benzonase核酸酶
(科研级) |
25KU |
400 |
|
| 100KU |
1,200 |
| 5000KU(工业级） |
30,000 |
| C2004 |
无内毒素Strep tagII Benzonase核酸酶 |
25KU |
500 |
|
| 100KU |
1,500 |
| 5000KU(工业级） |
45,000 |
| C2006 |
Benzonase核酸酶冻干品 |
100KU |
1,200 |
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| C2005 |
Benzonase核酸酶残留检测试剂盒 |
50T |
3,200 |
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| C0402 |
Strep-Tactin XT Resin |
5ml |
1,750 |
|
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Benzonase核酸酶，是一种核酸内切酶，可将核酸降解成2~5个碱基的5‘单磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式（双链，单链，线状，环状）的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性，又被称为“全能核酸酶”。Benzonase核酸酶能有效降低蛋白样品粘度，去除蛋白样品中核酸的污染，且无蛋白酶活性残留，核酸酶活性达1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在降低粘性的同时， 也具有多种其他用途，如：减少了样品处理时间，增加了蛋白产量，离心时时沉淀和上清分离的更彻底，更便于溶液的离心（尤其是超滤）；提高色谱纯化的效率等。
本公司Benzonase核酸酶包括四种，分别为不含任何标签的Benzonase核酸酶（科研级别）、无内毒素Benzonase核酸酶、Strep tagII Benzonase核酸酶（科研级别）和无内毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶，可适应不同下游用途的需求。其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通过Strep Tactin XT Resin高效去除，而无内毒素的两种Benzonase核酸酶，内毒素含量<40EU/mL（按照单位换算量计算为，每1000U中含有的内毒素<0.15EU），可适用于药用级别的研发和生产。另外，核酸酶残留可通过我公司开发的基于 荧光探针的Benzonase核酸酶残留检测试剂盒进行评测，15min即可完成检测，最低可检测到2ng/ml的核酸酶残留。
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用量推荐
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| 实验类型 |
电泳蛋白样品制备 |
非药物蛋白生产 |
药物蛋白生产 |
疫苗、病毒生产 |
细胞药物 |
| 推荐产品 |
Benzonase(科研级) |
Benzonase(科研级)
Strep-tagII Benzonase(科研级) |
Benzonase(无内毒素级)
Strep-tagII Benzonase(无内毒素级) |
| 细胞数量 |
1X106个细胞(10mg组织) |
1g湿重 （重悬液10mL） |
1L 发酵上清液 |
1L 培养物 |
| 最低用量 |
125U (0.5 µL) |
25U/mL(1 µL) |
25U/mL(1 µL) |
0.1U/mL(0.4 µL) |
0.1U/mL(0.4 µL) |
| 推荐用量 |
500U (2 µL) |
250U/mL(10 µL) |
250U/mL(10 µL) |
25U/mL(100 µL) |
5U/mL(20 µL) |
| 作用时间 |
通常作用时间37℃在15~60min；25℃在30~120min； |
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单位定义
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37℃，pH 8.0反应条件下，在30分钟内使△A260 值降低1.0(相当于完全消化37 μg DNA )的酶量定义为一个活性单位。
注意：含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品，对该酶活性有部分抑制作用，使用时需要增加酶的用量。 |
应用
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- 蛋白提取时去除核酸污染：在重组蛋白纯化或组织细胞样品蛋白提取时，Benzonase核酸酶可有效降低样品粘度，利于下游操作
- 与细胞或细菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白质产量
- 减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象
- 降解核酸，利于不可溶性蛋白复性前高质量包涵体制备
- 有效去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响，改善蛋白质的分离效果，增强2-DE分辨率
- 疫苗和病毒样品制备中DNA污染的去除
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储存
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| 置于-20°C，可保存2年。 |
实例分析
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| Fig1. 分别取不同量（0、0.125、0.25、0.5、1、5、10U）的Benzonase核酸酶消化人基因组DNA10min，进行琼脂糖电泳。 |
Fig2. A为未加Benzonase处理的，B为加Benzonase处理的
样品进行二维电泳。如图所示，Benzonase处理的样品可显
著增加二维电泳的分辨率。 |
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Fig3.经RIPA裂解未经Benzonase核酸酶处理的样品，
大量基因组DNA释放出来，呈鼻涕状。 |
Fig4.离心后，左管为未加Bezonase核酸酶，有鼻涕状
粘稠物质悬浮在管中，右管为加Bezonase核酸酶，上
清为透明液体。 |
超强兼容性
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| 全能核酸酶在非常广泛的条件下，都能保持很高的稳定性和消化核酸的活性，这使其能够与多种细胞裂解液，如RIPA，或含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。例如：>100mM的盐酸胍会完全抑制Benzonase活性，1mM的EDTA会部分抑制Benzonase活性，5mM的EDTA会使活性丧失90%，1mM的PMSF则不会抑制核酸酶活性。 浓度<0.4%的Triton® X-100对核酸酶活性几乎无影响，<0.4%的脱氧胆酸钠使核酸酶可保持70%的活性，超过该临界值之后核酸酶活性会急剧降低，1%的浓度会使活性丧失70%；0.05%的SDS对核酸酶活性几乎无影响，而SDS浓度在0.1%-1%之间时，核酸酶在变性后活性会急剧降低，可通过增加核酸酶的量使活性得到补偿。另外，核酸酶可耐受6M尿素，当尿素达到7M时，核酸酶在变性后活性会急剧降低，亦可通过增加核酸酶的量使活性得到补偿。 |
| 条件参数 |
最适条件 |
可作用条件范围 |
| Mg2+ |
1-2mM |
1-10mM |
| pH |
8.0–9.2 |
6–10 |
| 温度 |
37°C |
0–42°C |
| DTT |
0–100mM |
>100mM |
| β-Mercaptoethanol |
0–100mM |
>100mM |
| 一价阳离子浓度（如Na+，K+） |
0–20mM |
0–150mM |
| PO43- |
0–10 mM |
0–100mM |
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Benzonase的去除
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| 对于Strep-tag II标签的Benzonase核酸酶（C2003，C2004）可通过Strep Tactin XT Resin（HaiGene，C0402）直接 去除，去除率>95%；对于不带标签的Benzonase核酸酶（C2001，C2002），可通过色谱纯化去除核酸酶，然后可通过检测残留活性（HaiGene, C2005）或ELISA检测来判断去除是否成功。常见的色谱纯化方式有阳离子交换介质和阴离子交换介质，具体的Benzonase去除条件如下表： |
| 阴离子交换介质 |
pH |
样品和平衡缓冲液 |
Benzonase核酸酶 |
| TMAE |
7.0 |
50mM Tris/200mM NaCl |
not bound |
| TMAE |
7.0 |
50mM Tris/50mM NaCl |
not bound |
| TMAE |
8.0 |
50mM Tris/250mM NaCl |
not bound |
| TMAE |
8.0 |
>50mM Tris/100mM NaCl |
not bound |
| TMAE |
9.0 |
>50mM Tris/200mM NaCl |
not bound |
| TMAE |
9.0 |
50mM Tris/100mM NaCl |
not bound |
| DEAE |
7.0 |
50mM Tris/200mM NaCl |
not bound |
| DEAE |
7.0 |
50mM Tris/50mM NaCl |
not bound |
| DEAE |
8.0 |
50mM Tris/250mM NaCl |
not bound |
| DEAE |
8.0 |
>50mM Tris/100mM NaCl |
not bound |
| DEAE |
9.0 |
>50mM Tris/250mM NaCl |
not bound |
| DEAE |
9.0 |
50mM Tris/50mM NaCl |
not bound |
| DMAE |
8.0 |
>50mM Tris/250mM NaCl |
not bound |
| DMAE |
8.0 |
50mM Tris/50mM NaCl |
not bound |
| 阳离子交换介质 |
pH |
样品和平衡缓冲液 |
Benzonase核酸酶 |
| SO3- |
6.0 |
20mM phosphate/100mM NaCl |
bound |
| SO3- |
6.0 |
20mM phosphate/200mM NaCl |
not bound |
| SO3- |
5.0 |
20mM acetate/200mM NaCl |
bound |
| SO3- |
5.0 |
>20mM acetate/700mM NaCl |
not bound |
| SO3- |
4.0 |
>20mM acetate/300mM NaCl |
bound |
| SO3- |
4.0 |
20mM acetate/800mM NaCl |
not bound |
| C00- |
6.0 |
20mM phosphate/0mM NaCl |
not bound |
| C00- |
5.0 |
20mM acetate/40mM NaCl |
bound |
| C00- |
5.0 |
20mM acetate/100mM NaCl |
not bound |
| C00- |
4.0 |
>20mM acetate/150mM NaCl |
partially bound |
| C00- |
4.0 |
20mM acetate/400mM NaCl |
not bound |
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