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LAMP-TaqMan扩增试剂盒

HaiGene专利技术,未来的明星检测技术。
产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A3808A LAMP-TaqMan扩增试剂盒 200T 6,500
A3808B 1000T 24,500
A3808C 大量定制 询价
A5301 LAMP-TaqMan DNA 标准品 5 μg 1,000  
A5302 LAMP-TaqMan RNA 标准品 5 μg 2,000  
A5401 LAMP-TaqMan 扩增试剂盒全套开发 询价  
LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)是一种新型核酸扩增技术。采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物,依赖于Bst DNA聚合酶的强链置换活性,在20~60分钟内DNA扩增可达109~1010倍。 LAMP技术自2000年由Notomi首次公布后,因其具有的快速扩增能力,使其成为开发诊断试剂的明星潜力技术。但发展至今近20年时间,其仍然无法在诊断试剂领域获得广泛应用。LAMP技术的突出问题就是其假阳性、非特异扩增严重,无法产生高特异性信号。在采用浊度、HNB显色方法进行检测时,一组良好的LAMP引物需要长时间、多条件的优化才能获得。将类似标准定量PCR中的TaqMan探针技术应用到LAMP检测中,一直是分子生物家追求的目标。至今,虽有多种探针设计方案,但均无法满足准确、可靠、快速的要求。
HaiGene于2018年成功开发出具有切割荧光探针活性的Bst5.0 DNA聚合酶,并将该酶成功用于LAMP的荧光检测,在利用LAMP快速、高灵敏度、恒温检测优点的基础上,彻底解决了LAMP技术的假阳性问题。该技术为HaiGene原创性发明,这是一项划时代的基因检测技术,我们相信其将成为基因检测领域的明星技术,并获得研究者和使用者高度关注。Bst5.0 DNA聚合酶具有强链置换能力、高效DNA合成能力、具有外切酶活性,其无论以DNA为模板还是以RNA为模板,均可实现65℃恒温条件下类似TaqMan PCR方法的扩增,整个检测通常在20~30min内即可完成。此外,Bst 5.0应用了核酸适配体技术,使得LAMP扩增得以热启动(又名WarmStart)。试剂盒中的LAMP TaqMan探针(通常30~45bp长度)为荧光基团和淬灭基团标记,当Bst 5.0 DNA聚合酶切割荧光基团后,游离的荧光基团即发出荧光信号,原理与TaqMan PCR相同。
注:本产品为定制型产品,定制周期为7个工作日。如需订购,请发送基因序列信息至order@haigene.cn, 我公司负责引物和探针的制备。

主要特征

  • 特异性高:六条特异性引物和一条TaqMan探针,保证了产物的特异性和检测的可靠性。
  • 灵敏度高:能从极低拷贝中扩增靶基因。
  • 快速检测:可在20min以内完成检测。
  • 操作简单:反应体系简单、稳定,操作方便,适合批量化操作。
  • 恒温检测:对设备性能要求低。
  • 适合粗样品的检测,无需核酸纯化制备
  • 组分

    名称 200T 1000T
    2×LAMP TaqMan Mix 1 ml×2 1 ml×10
    10×LAMP TaqMan Assay 400 μl 1 ml×2

    原理

    LAMP TaqMan 扩增试剂盒

    储存

    -20℃可保存3年,避免反复冻融。

    实例

    以非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)外膜蛋白P72为靶基因(GenBank No.:AY578706)设计的LAMP TaqMan Assay进行检测,在65度恒温条件下,30min可检测到10 copy/μl的核酸分子, 因此,该LAMP-TaqMan扩增试剂盒对猪瘟病毒的检测具有卓越的扩增性能和灵敏度。

    非洲猪瘟病毒检测LAMP TaqMan

    具体信息如下:
    物种非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)
    检测类型DNA
    靶基因P72外膜蛋白(GenBank No.: AY578706)
    靶基因序列TAAAGCGCTCGCCGAAGGGAATGGATACTGAGGGAATA
    GCAAGGTTCACGTTCTCGTTAAACCAAAAGCGCAGCTTA
    ATCCAGAGCGCAAGAGGGGGCTGATAGTATTTAGGGGTTT
    GAGGTCCATTACAGCTGTAATGAACATTACGTCTTATGTC
    CAGATACGTTGCGTCCGTGATAGGAGTGATATCTTGTTTAC
    CTGCTGTTTGGATATTGTGAGAGTTCTCGGGAAAATGTTGT
    GAAAGAAATTTCGGGTTGGTATGGCTGCA
    LAMP TaqMan所用引物序列
    ASFV P72 F3CGAAGGGAATGGATACTGA
    ASFV P72 B3CATACCAACCCGAAATTTCT
    ASFV P72 LoopFGCTCTGGATTAAGCTGCG
    ASFV P72 LoopRTTGTTTACCTGCTGTTTGGATA
    ASFV P72 FIPTACTATCAGCCCCCTCTTGCGGAATAGCAAGGTTCACG
    ASFV P72 BIPCGTTGCGTCCGTGATAGGTTTCCCGAGAACTCTCAC
    ASFV P72 Probe(FAM)AGGTCCATTACAGCTGTAATGAACATTACGTCTT(BHQ)

    注意事项

    1. LAMP为高灵敏度实验,为了减少交叉污染,请分区操作,实验完毕后EP管盖务必不要打开,防止气溶胶污染。
    2. LAMP TaqMan Assay为定制型探针,由我处负责设计合成,我们不建议非专业人员进行设计合成。
    3. 在LAMP实验中建议使用标准品作为阳性对照,水对照作为NTC。如需要DNA或RNA标准品,请联系我处进行制备。

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