TaqMan定量PCR试剂
Apta Probe qPCR LyoMix(预冻干液)
————Aptamer封闭，全程热启动调节、高特异性、快速PCR
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HotStart AptaTaq DNA Polymerase为第三代Taq DNA聚合酶（RAPA3G DNA Pol），具有5’-3’外切酶活性，不具有3’-5’外切酶活性，其具有最高的杂质耐受性（对乙醇、胍盐、肝素具有极高的耐受性），因此对于纯度较差的DNA模板，该酶仍然可以获得理想的实验结果。除此外，AptaTaq DNA聚合酶是一种快速酶，该酶具有4kb/min的延伸速度，在快速qPCR中，10s的退火和延伸时间，即可完成片段的扩增和探针切割。 AptaTaq DNA聚合酶为高亲和力的核酸适配体（Aptamer）封闭酶活性中心，因此在低温下DNA聚合酶无活性，当温度升高到50℃，核酸适配体脱离酶活性中心，从而释放酶活。区别于抗体和化学修饰的热启动方法，Aptamer在PCR扩增的全程扩增中，均能有效调节DNA Pol的活性，这有助于获得更高灵敏度的扩增。 Apta Probe qPCR LyoMix 为扩增DNA靶标试剂，形式为液体预冻干形态。其不仅能用于常规科研体系的使用，专属的冻干配方，还使得冻干产品开发和生产在一种试剂下同步完成。使用本试剂无需加入任何其它辅助试剂即可完成全体系的冻干制品。 AptaET Probe RT-qPCR LyoMix为扩增RNA靶标试剂，其包含的逆转录酶为为HaiGene最新开发的极度耐热逆转录酶-ET Reverse Transcriptase (Extreme ThermoStable Reverse Transcriptase)，该酶在85度加热2min后仍然保留>85%的活性，最佳逆转录温度为55-75℃。这种高温逆转录的特性将极大的降低非特异扩增、增加靶标的检测灵敏，提高多重PCR、高GC含量靶标的扩增性能。 |
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功能测试 |
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| （该实验结果来自HaiGene实验室，未经允许，不得转载） | |||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.使用AptaET Probe RT-qPCR LyoMix以人RNA total RNA（100 ng – 0.1 pg，10 倍梯度稀释）对Actin 基因进行qPCR 检测，分别进行85℃ 2min组和不加热组进行比较，每个浓度的样品做 3 个复孔。在两组 qPCR检测中，基因靶标都可有效扩增，Ct数无明显差异，说明ET Reverase Transcriptase（极度耐热反转录酶） 在85℃加热 2min后保留全部活性。 | |||||||||||||||||||||||||||||||
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| 2.使用AptaET Probe RT-qPCR LyoMix以人total RNA（10 ng – 0.1 pg）和MS2 RNA（0.1 ng – 0.1fg）进行单重（左）和双重（右）qPCR 检测。在双重 qPCR和单重 qPCR检测中，两个基因靶标都可有效扩增，Ct数无明显差异。 | |||||||||||||||||||||||||||||||
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