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血清/血浆miRNA提取试剂盒

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
B1804 血清血浆miRNA提取试剂盒 25T/100T 800/2400
血清血浆miRNA含量较组织细胞或外周血低,市面上现有的试剂盒提取血清血浆小RNA的得率普遍较低,因此很难用于后续的定量检测。新海基因血清血浆miRNA提取试剂盒通过一步上柱即可获得高纯度miRNA,可在10min左右完成小RNA的提取,是目前提取小RNA(<200nt)操作步骤最简单、重复性最好、小RNA产率最高的方法。使用该试剂盒提取的小RNA(Small RNA)中,长度在15~200nt范围的RNA在95%以上,基本不含有大RNA和DNA,可直接用于后续的反转录、Northern 杂交、测序等应用。

组分

名称 数量
B1804A B1804B
Serum/Plasma miRNA Reagent 15ml 60ml
miRNA 吸附柱 25套 100套
RnaseFree TE Buffer 5ml 5ml

储存

室温可保存2年。

常见问题

(1) 由于血清血浆中的miRNA含量极低,提取的miRNA浓度通常在5 ng/μl以下,因此难以用常规的NanoDrop测量浓度,建议直接使用10μl进行下游反转录。由于本试剂盒提取的是小RNA,该浓度下的miRNA Copy数足以进行下游检测。
(2) 由于血清血浆中miRNA的含量低,为了获得更可靠的实验数据,建议使用特异性和灵敏度更好的TaqMan探针法进行miRNA的下游检测。本试剂盒提取的miRNA并不限于其它检测方法和用途,包括SYBR Green法检测、二代测序、芯片等检测领域。
(3) 新海基因的D1803血清血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒为血清血浆专用,不可用于细胞和组织的miRNA检测实验。使用D1803获得的反转录产物仅可使用本公司的HG TaqMan miRNA qPCR试剂盒(货号:TAPXXXXX)。在使用D1803反转录条件下,应用货号为TAP01511检测内源hsa-miR-16, Ct值通常在24左右。
(4)外源性内参可单独订购cel-miR-39 标准品(货号:B1805),每个样品每次提取cel-miR-39的使用量为50fmol。
(5)抗凝血剂要避免使用含有肝素的凝血管,因为肝素会抑制反转录 (reverse tranion) 和聚合酶 (polymerase) 的反应。

实例

1.不同血清体积对定量PCR的影响,以hsa-miR-16 qPCR为例,反转录应用血清血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒(D1803),定量PCR试剂盒用TAP01511。
血清血浆miRNA提取试剂盒
2.应用该血清血浆miRNA提取试剂盒(B1804)从500μl的血清样本中获得小RNA,血清血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒(D1803)进行反转录,然后用HG TaqMan miRNA定量试剂盒分别检测不同的8种miRNA表达。
血清血浆miRNA定量PCR