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TdT末端转移酶(Terminal Transferase)

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
C5011 TdT末端转移酶(Terminal Transferase) 500U 400
2,500U 1,500
末端转移酶(TdT)是一种不依赖于模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3’羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物,加尾长度可达5~300nt。该末端转移酶(TdT)分子量为58.3 kDa,无5’和3’核酸外切酶活性,反应中加入Co2+可提高加尾效率。该酶广泛用于DNA的3’末端添加同聚物、利用修饰碱基(如ddNTP,DIGdUTP)标记DNA 3’末端、TdT介导的dUTP 缺口末端标记技术(细胞凋亡的原位检测)等试验。该酶经检测无DNA内切酶和外切酶污染,不含RNase。

组分

组分名称 数量
Terminal Transferase (20 U/μl) 25 μl/125 μl
10×TdT Buffer 1 ml
10 mM CoCl2 250 μl

应用

  • 寡核苷酸或DNA 3’羟基末端标记
  • DNA末端加尾(DNA tailing)
  • 5’-RACE
  • 合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链
  • 活性定义

    37℃60分钟内,催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3’羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位

    1×TdT Buffer

    100mM KCl, 30mM Tris-acera, 0.05% (v/v) Triton X-100 (pH 7.5 at 25 °C)

    储存

    -20℃可保存3年。

    热失活

    75°C 20min。

    注意事项

    1、适量EDTA可使Terminal Transferase的活性丧失。
    2、金属离子螯合剂,较高浓度的铵根离子、氯离子、碘例子和磷酸根离子均对Terminal Transferase活性具有抑制作用。