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热稳定无机焦磷酸酶

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
C5007A 热稳定无机焦磷酸酶 200U 300
C5007B 2,000U 2,000
热稳定无机焦磷酸酶纯化自重组 E. coli 菌株,携带从极度耐热的 Thermococus litoralis 中克隆的无机焦磷酸酶基因。该焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。 P207–4 + H20 →2HP04–2。该酶在100℃加热4h仍然具有100%活性,因此可用于PCR反应,解除生成的无机焦磷酸盐对PCR的抑制,增强DNA的复制。

组分

组分名称 数量
Thermostable Inorganic Pyrophosphatase (2 U/μl) 100 μl/1 ml

活性定义

1单位指标准反应条件下:0.5ml反应体系,50mM Tricine pH8.5,1mM MgCl2和0.32mM PPi,75℃反应10 钟,每分钟催化无机焦磷酸盐生成1μmol 磷酸盐的酶量。

储存

-20℃可保存3年。

使用注意事项

(1) 该酶在多种反应Buffer中均具有活性,通常该酶在tHDA扩增、PCR、测序反应等实验中,可直接接入即可。
(2) 该酶的用量在不同的实验中需要优化,通常在5~50U/ml浓度调整。
(3) 该酶不可以热失活。

实例

热稳定无机焦磷酸酶
Fig:以Bst2.0扩增的LAMP产物作为底物,分别应用不同量的热稳定无机焦磷酸酶在65℃作用1h,肉眼观察管内变化。管1为不加Bst 2.0 DNA 聚合酶的LAMP产物,管2为Bst 2.0 DNA聚合酶的LAMP扩增产物,管3-7为在管2产物中分别加入不同量热稳定无机焦磷酸65℃作用1h的产物。其中管3-7加入的焦磷酸酶的量分别为:0.1μl、0.25μl、0.5μl、0.75μl和1μl。